Геном человека содержит дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) матери и отца в равных долях. Именно ДНК отвечает за хранение и передачу наследственной информации. На этом свойстве базируются все исследования по определению отцовства методом ДНК-экспертизы. Методы ДНК-анализа.
Сделать ДНК-тест на отцовство можно по личному желанию родителей или экспертиза проводится в судебном порядке.
Биологический материал, необходимый для выполнения анализа ДНК, может быть различным (см. Нестандартные образцы выделения ДНК): волосы, ногти, ушная сера, слюна, сперма, кровь и многое другое.
Стандартным материалом является эпителий слизистой, покрывающий щечную поверхность ротовой полости. Эпителий или ротовой мазок получают путем проведения специальной стерильной палочкой по внутренней поверхности щеки. Полученные образцы тщательно упаковываются в стерильные конверты-контейнеры и сопровождаются бланками, где указаны ФИО каждого тестируемого и их предполагаемое родство.
Образцы с генетическим материалом хранятся несколько месяцев.
Генетический анализ начинается:
с вычленения из биоматериала ДНК-молекул, которые находятся в хромосомах. В ходе полимеразной цепной реакции (ПЦР) воспроизводится тысячи генокопий молекул ДНК.
Следующий этап – исследование небольших участков генома ДНК человека – локусов генетическими анализаторами.
Варианты последовательности расположения ДНК (нуклеиновых кислот) в локусе носит название аллелей. Количество аллелей у каждого локуса различны. Их может быть 5-7, а у некоторых форм их количество доходит до 20 и более. По каждому локусу человек наследует две аллели (два варианта) – от матери и отца. Локусы различаются по длине фрагмента и последовательности распределения нуклеотидов.
В современных лабораториях ДНК-тест на отцовство осуществляют одновременно по 25-40 локусам.
В основе молекулярно-генетического метода определения родства лежит сравнительный анализ полиморфных, то есть имеющих много аллельных форм, локусов ДНК ребенка и предполагаемого отца.
Трактовка результатов теста ДНК.
Если в результатах теста ребенка и возможного отца выявлено отсутствие общих аллелей (вариантов) в трех и более локусах – это исключает вероятность родства.
Несовпадения по 1-2 локусам может быть следствием мутации или не исключается возможность, что биологический отец ребенка – близкий родственник тестируемого мужчины (отец, брат, сын). В таком случае установление родства проводят дополнительными исследованиями по расширенной программе.
Идентичность локусов у гипотетического отца и ребенка свидетельствует в пользу кровного родства между ними.
При установлении отцовства для повышения информативности теста выполняют исследование ДНК генома матери.
Одним из важных показателей при тестировании ДНК, определяющих вероятность отцовства, является комбинированный индекс отцовства (КИО).
Вероятность отцовства (ВО) – это величина, показывающая какова вероятность в процентах, что тестируемый мужчина – это биологический отец данного ребенка. Формула для расчета: ВО=КИО.
Для установления отцовства – показатель ВО должен быть не менее 99,99%.
В России отцовство признается доказанным при ВО не менее 99,9%, если тестировались трое: мать, ребенок и возможный отец.
Если генетическая экспертиза проходила с участием двоих: ребенка и предполагаемого отца, то доказательством отцовства является показатель ВО не менее 99,75%. Вероятность отцовства никогда не достигает 100%, так как допускается теоретическая возможность существования в человеческой популяции мужчины с набором таких же генов.